WAT IS EEN EENVOUDIGE KLEURING? UITSTEKENDE EIGENSCHAPPEN - BIOLOGIE - 2026

De enkele kleuring is een snelle en eenvoudige kleuringsprocedure waarbij een enkele kleurstof wordt gebruikt, dus het wordt eenvoudig genoemd. Het wordt voornamelijk gebruikt om de morfologie en organisatie van de cellen in een monster te bepalen.

Cellen zijn van nature kleurloos, dus het is nodig om ze op de een of andere manier zichtbaar te maken als ze onder de microscoop worden bekeken.

Menselijke wangcellen gekleurd door eenvoudige methyleenblauwkleuring.

Het is belangrijk op te merken dat de kleurstoffen die worden gebruikt bij eenvoudige kleuring basisch moeten zijn met een positieve lading (kationisch), zodat ze spontaan kunnen binden aan de celwand en het cytoplasma.

Deze cellulaire structuren zijn negatief geladen. Dit is de reden waarom de positief geladen kleurstof wordt aangetrokken door cellen en er spontaan aan bindt. Alle cellen in een monster worden dus snel gekleurd.

Kleurstoffen die worden gebruikt bij eenvoudige kleuring

Er zijn verschillende basiskleuren die kunnen worden gebruikt in het microbiologisch laboratorium. De meest gebruikte zijn:

- Methyleenblauw.

- Kristalviolet.

- Malachiet groen.

- Basis fuchsine.

Al deze kleurstoffen werken goed in bacteriën omdat ze positief geladen (kationische) kleurionen (chromoforen) hebben.

De kleuringstijden voor de meeste van deze vlekken zijn relatief kort. Ze variëren over het algemeen van 30 seconden tot 2 minuten, afhankelijk van de affiniteit van de kleurstof.

Het is belangrijk om in gedachten te houden dat voordat een monster door middel van eenvoudige kleuring wordt gekleurd, het moet worden uitgetrokken en op het glaasje (objectglaasje) moet worden bevestigd; het uitgebreide en gefixeerde monster wordt een uitstrijkje genoemd.

De 6 stappen om eenvoudig te kleuren

Stap 1

Plaats de dia op een kleurrek en breng de gewenste kleurstof aan. Laat de bijbehorende tijd werken.

Normaal gesproken duurt een eenvoudige kleuring een paar seconden tot een paar minuten, afhankelijk van de gebruikte vlek.

Observatie

In deze stap is het belangrijk om de aanbevolen tijd voor de gebruikte kleurstof niet te overschrijden, aangezien er zich kristallen kunnen vormen op het vel, die zogenaamde "artefacten" produceren die de morfologie van de cellen verstoren.

Stap 2

Was het uitstrijkje van het objectglaasje grondig met gedestilleerd water uit een fles, of ook langzaam stromend leidingwater, totdat de afvoer helder wordt. Dit duurt gewoonlijk 5-10 seconden.

Observatie

Breng de waterstroom niet rechtstreeks op het uitstrijkje aan, om te voorkomen dat de kracht van hetzelfde het monster beschadigt.

Als u geen gedestilleerd water heeft, kunt u zonder problemen leidingwater gebruiken, aangezien dit het resultaat van de kleuring niet beïnvloedt.

Stap 3

Dep het objectglaasje met absorberende papieren handdoeken in één richting en zonder te wrijven. Zorg ervoor dat de onderkant van de schuif schoon is.

Stap 4

Bekijk het gekleurde uitstrijkje onder de microscoop. Begin met de meest afgelegen doelen om het gebied dat u in meer detail wilt observeren, correct te lokaliseren. Verander het doel om steeds dichter bij het monster te komen.

Observatie

Voor het gebruik van het objectief met een sterkere vergroting (normaal 100x) moet immersie-olie worden gebruikt, omdat dit helpt om het licht beter door te laten dringen en het beeld er scherper uitziet. Het is niet nodig om een ​​dekglaasje te gebruiken.

Stap 5

Gooi ten slotte alle monsters weg in een geschikte container met het juiste label "biologisch gevaarlijk".

Referenties

1. (2001). Microbiologisch Toepassingen: Laboratory Manual in Algemene Microbiologie (8 ^ste red.). De McGraw-Hill-bedrijven.
2. Harisha, S. (2006). Een inleiding tot praktische biotechnologie (1 ^e ). Firewall-media.
3. Moyes, RB, Reynolds, J., & Breakwell, DP (2009). Voorafgaande kleuring van bacteriën: eenvoudige vlekken. Huidige protocollen in de microbiologie, (SUPPL. 15), 1–5.
4. Pommerville, J. (2013). Alcamo Fundamentals of Microbiology Laboratory (10 ^th ). Jones & Bartlett leren.
5. Prescott, H. (2002). Laboratoriumoefeningen in de microbiologie (5 ^e ). De McGraw-Hill-bedrijven.
6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Principes van Microbiologie ( ^1ste ). Tata McGraw-Hill Education.