LACTOFENOLBLAUW: KENMERKEN, SAMENSTELLING, BEREIDING, GEBRUIK - CHEMIE - 2026

Het lactofenolblauw of blauw katoen wordt bereid met eigenschappen van een enkele kleurstof. Het wordt gebruikt in klinische laboratoria om voornamelijk schimmelstructuren te kleuren, zoals hyfen, kiembuizen en sporen.

Het helpt bij de vermoedelijke of voorlopige diagnose van bepaalde schimmels, maar het is altijd raadzaam om de diagnose te versterken met specifiekere tests, zoals biochemische of serologische tests.

Grafische weergave van lactofenolblauw kleuring, uitstrijkje gekleurd met lactofenolblauw, preparaat gemonteerd op een microscoop. Bron: public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8

Lactofenolblauw bestaat uit melkzuur, anilineblauw, glycerine, fenol en gedeïoniseerd water. Het kan worden bereid in het laboratorium of het kan kant-en-klaar worden gekocht. Eenmaal voorbereid, is het klaar om te worden gebruikt, het mag in geen geval worden verdund, omdat deze actie vreselijke resultaten zal opleveren.

De concentratie van zijn componenten maakt het ideaal voor het kleuren van schimmelstructuren, aangezien fenol de bijbehorende bacteriële microbiota elimineert, terwijl melkzuur een beschermende film rond de schimmelstructuur genereert. Ten slotte heeft anilineblauw een affiniteit om zich te hechten aan de structuren van de schimmel.

Basis

Met lactofenolblauw wordt een eenvoudige kleuring van de schimmelstructuren van een bepaalde mycologische cultuur uitgevoerd. Het wordt simpel genoemd omdat het slechts één kleurstof gebruikt.

Lactofenolblauw werkt, behalve kleuring, ook als een klaringsmiddel van het monster, dankzij de gezamenlijke werking van melkzuur en fenol, bovendien gedraagt ​​fenol zich als een bijtmiddel en voorkomt het tegelijkertijd de lysis van het micro-organisme door de hydrolytische enzymen te remmen die kan aanwezig zijn.

Terwijl melkzuur de morfologie van de structuren van de schimmel behoudt.

Aan de andere kant heeft anilineblauw de eigenschap zich te hechten aan of te binden aan chitine-bevattende structuren. De structuren zijn lichtblauw gekleurd.

Opgemerkt moet worden dat de celwand van schimmelmicro-organismen, vooral schimmels, chitine bevat, daarom is deze kleurstof ideaal voor het kleuren van deze micro-organismen.

kenmerken

Lactofenolblauw-oplossing is een sterk zure, licht troebele, waterige kleurstof met een lichtblauwe kleur. Het blijft stabiel als het wordt bewaard tussen 15 ° C en 25 ° C. De fles moet goed gesloten worden gehouden. Het is irriterend en bijtend voor de huid en slijmvliezen.

Samenstelling

De formule om één liter lactofenolblauw te bereiden is als volgt:

-250 g / L melkzuur

-1,0 g / l anilineblauw of methylblauw

-500 g / l glycerine

-250 g / l fenol

-250 ml gedeïoniseerd of gedestilleerd water.

Het fenol wordt opgelost in het eerder verwarmde water. Melkzuur en glycerine worden toegevoegd en zeer goed gemengd. Ten slotte lost het anilineblauw op. Het mengt weer en is klaar voor gebruik.

De porties om 80 ml lactofenolblauw-oplossing te bereiden zijn:

-20 g fenolkristallen

-20 ml melkzuur

-40 ml glycerine of glycerol

-20 ml gedestilleerd water.

Gebruik

Het wordt gebruikt om schimmelstructuren te kleuren en, door de morfologische kenmerken waargenomen op microscopisch niveau, om een ​​vermoedelijke diagnose van de schimmel te kunnen stellen.

Werkwijze

Kleuring van schimmelstructuren van culturen

- Neem een ​​zuivere kweek van de schimmel waarvan de structuren moeten worden waargenomen.

- Werk bij voorkeur in een kap met laminaire stroming, of onder de aansteker, met gebruik van een masker en handschoenen, aangezien het noodzakelijk is om te voldoen aan de bioveiligheidsnormen, omdat de meeste schimmels zich gemakkelijk verspreiden in het milieu en daarom een ​​gevaar vormen voor de operator.

- Een druppel lactofenolblauw wordt op een glaasje geplaatst.

- Knip een klein vierkant plakband van goede kwaliteit af en plak dit heel voorzichtig op het uiteinde van het koudgesteriliseerde platina-handvat.

- Het platina handvat wordt dicht bij het meest oppervlakkige deel van de schimmelkolonie gebracht en de cultuur wordt heel voorzichtig aangeraakt, precies waar het plakband zit.

- Vervolgens wordt het naar de dia gebracht en precies op de druppel lactofenolblauw geplaatst, waarbij ervoor wordt gezorgd dat de tape perfect wordt verlengd en gesmeerd met de kleurstof. De platina handgreep is zeer subtiel verwijderd.

- Nog een druppel lactofenolblauw wordt op de tape geplaatst en een dekglaasje erop. Oefen niet te veel druk uit om de structuren van de schimmel niet te vernietigen, omdat ze extreem kwetsbaar zijn. De kleurstof moet ongeveer 3 tot 4 minuten inwerken.

- Na deze tijd is het preparaat klaar om onder een microscoop te worden bekeken in een vergroting van 10x of 40x. Als 100x observatie vereist is, moet immersieolie worden gebruikt.

- De structuren van de schimmel zijn over het algemeen blauw gekleurd, met uitzondering van de dematiaceuze schimmels die hun kenmerkende bruine kleur van dit type schimmel behouden.

Directe kleuring van biologische monsters

Als het nodig is om een ​​direct biologisch monster te bestuderen, zoals sputum, pus, exsudaten, afscheidingen, onder andere, moeten deze een eerdere procedure hebben voor het decontamineren van het monster. Hiervoor wordt een NaOH-oplossing gebruikt.

In het geval van haarmonsters kunnen deze direct worden geverfd.

Meerdere aangetaste haren (10 in totaal) worden uit de vermoedelijke tinea capitis laesies (alopecische gebieden) gehaald en op een objectglaasje geplaatst (3 tot 4 haren per objectglaasje). Een paar druppels lactofenolblauw worden bovenop geplaatst en onmiddellijk bedekt met een dekglaasje.

Pak het objectglaasje met een pincet vast en verwarm zachtjes boven een brander. Maak hiervoor 3 tot 4 snelle passages door de vlam. Bekijk de microscoop op 40X en zoek naar sporen buiten of binnen het haar (respectievelijk ectothrix of endothrix). Voeg indien nodig immersieolie toe en observeer bij 100X.

Kiembuiskleuring bij de identificatie van

Na incubatie van de vermoedelijke kweek van Candida albicans in menselijk serum gedurende 2 tot 4 uur bij 37 ° C, wordt een deel van de oplossing genomen en gekleurd met lactofenolblauw. De bereiding wordt bij 40x onder de microscoop bekeken. De kiembuis is aanwezig en de blastosporen kleuren helderblauw.

Lactofenol veiligheidsinformatieblad

De National Fire Protection Association (NFPA) stelt het veiligheidsinformatieblad voor chemische stoffen vast in termen van het risico dat het vertegenwoordigt volgens verschillende aspecten, deze worden gesymboliseerd door een gekleurde ruit en een nummer variërend van 0- Vier.

Gezondheidsrisico's worden aangegeven in blauw, ontvlambaarheid in rood, instabiliteit of reactiviteit in geel en elk speciaal gevaar in wit.

Gezondheid

Het gezondheidsrisico van lactofenolblauw volgens de NFPA is niveau 3. Dit betekent dat de stof extreem gevaarlijk is bij inslikken of bij direct contact met huid of slijmvliezen.

Het is een sterk bijtende en irriterende stof.

Bij contact met huid en slijmvliezen veroorzaakt het ernstige brandwonden.

Als het wordt ingeslikt, kan het hoofdpijn, verwarring, lethargie, bewusteloosheid, ademstilstand en zelfs de dood veroorzaken.

Ontvlambaarheid

Volgens de NFPA heeft Lactophenol Blue een niveau 1 voor ontvlambaarheid. Dit betekent dat het alleen brandt als het wordt verwarmd boven 94 ° C.

Instabiliteit

Opgenomen volgens de NFPA op niveau 0 (nul) in termen van reactiviteit. Dit betekent dat het geen risico op reactiviteit heeft, dat wil zeggen dat het een chemisch stabiele stof is.

Bijzondere gevaren

Het biedt geen extra speciale gevaren.

Referenties

1. SAR-laboratorium. Lactophenol Blue. 2010. Beschikbaar op: labsar.com.
2. Toegepast laboratorium voor klinische chemie. Lactofenol blauw. 2015 Beschikbaar op: cromakit.es
3. Merck Laboratories. Microscopie van lactofenolblauw in oplossing. 2017 Beschikbaar op: Users / Equipo / Downloads
4. Noodkaart. Lactofenolblauw-oplossing voor schimmelkleuring. Universidad Pontificia Javeriana, Bogotá Colombia. 2014 Beschikbaar op: javeriana.edu.co
5. González M, Diamont D, Gutiérrez B. Techniek voor het kleuren van schimmelstructuren met plantaardige kleurstoffen als een niet-vervuilend alternatief. Bioagro, 2011; 23 (1): 65-68. Verkrijgbaar bij: Redalyc.
6. Laboratorium Himedia. Lactophenol Cotton Blue. 2017. Beschikbaar vanaf: himedialabs.com
7. Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, Actor J, Dasgupta A. Biochemische tests en kleurtechnieken voor microbiële identificatie. Science Direct, 2017; 61-73. Verkrijgbaar bij: Elsevier