- Fundering en materialen
- materialen
- Stappen
- Macroscopisch en microscopisch onderzoek
- Originele Faust-techniek
- Faust-techniek door centrifugeren
- Voordeel
- Nadelen
- Referenties
De Faust-techniek is een methode die de concentratie van sommige eieren en / of larven van parasieten in de ontlasting mogelijk maakt door te drijven. Het wordt gebruikt wanneer directe coproparasitologische tests negatief zijn of wanneer u schone monsters zonder afval wilt verkrijgen.
Concentratiemethoden voor coproparasitologische onderzoeken zijn van drie soorten: door flotatie, door sedimentatie of door methoden die de vorige twee combineren. Deze methoden vergroten de kans op positieve resultaten.

Ontlasting analyse.
De Faust-methode bestaat uit het mengen van een deel van het ontlastingsmonster met een stof die dichter is dan de te concentreren eieren of parasieten. Dit zorgt ervoor dat ze, omdat ze minder dicht zijn, op het oppervlak drijven. De bovenstaande vloeistof wordt verzameld en onder een microscoop bekeken voor identificatie en kwantificering.
Deze methode wordt gebruikt om wormeieren te visualiseren. Tegelijkertijd is het een zeer gevoelige methode gebleken voor de diagnose van Giardia lamblia, een protozoa met flagellen dat wereldwijd wijdverspreid is. Flotatiemethoden worden niet aanbevolen voor zeer zware parasieteneieren zoals lintwormen en trematoden.
Parasieten zijn wereldwijd een van de meest voorkomende darminfecties, vooral in arme landen met slechte hygiënische maatregelen. Om deze reden is het hebben van gevoelige methoden om deze parasieten te identificeren en te kwantificeren erg nuttig voor diagnose en behandeling.
Fundering en materialen
De techniek is gebaseerd op het bestaan van de verschillende specifieke zwaartekrachten van eieren, parasieten, cysten, larven en afval, waarbij zinksulfaatoplossingen als flotatiemethode worden gebruikt.
De grondgedachte voor de techniek is om het monster te mengen met een zinksulfaatoplossing die een hogere dichtheid heeft dan lichtere eieren, larven of parasieten.
Hierdoor kunnen de zwaardere elementen neerslaan en de lichtere drijven die na centrifugatie van de monsters in het supernatant verschijnen.
materialen

Containers voor het verzamelen van fecale monsters (Bron: Bobjgalindo via Wikimedia Commons)
- Bereid een zinksulfaatoplossing met een dichtheid van 1,18 of 1,2 g / ml als het monster eerder is behandeld.
- Maak een rek klaar met eerder gelabelde reageerbuizen.
- Heb een centrifugale machine.
- Houd microscoopglaasjes en dekglaasjes bij de hand. Ze moeten allemaal worden geëtiketteerd
- Zorg ervoor dat er een oplossing van Lugol beschikbaar is om de lakens te kleuren.
- Heb een gaasje om te filteren.
- Zorg voor trechters en gedestilleerd water.
- Zoek gelabelde plastic of kartonnen containers.
- Ook applicators en steriel handvat van 5 mm.
- Een aansteker om het handvat te steriliseren.
Stappen
Macroscopisch en microscopisch onderzoek
Voor elk stoelgangonderzoek begint het onderzoek met wat het "grove onderzoek" van de monsters wordt genoemd.
De consistentie, kleur, aanwezigheid van wat lijkt op bloed, de aanwezigheid van slijm en de aanwezigheid van volwassen parasieten worden beschreven.
Daarna gaan we verder met het "microscopisch onderzoek" van de ontlasting, dit is afhankelijk van de methode. De eenvoudigste is de directe uitstrijkmethode, de eenvoudigste microscopische observatiemethode voor parasieten.

Foto van de waarneming van Gardia lamblia, een darmparasiet (Bron: Riddlemaster via Wikimedia Commons)
De procedure omvat het plaatsen van een kleine hoeveelheid van het monster rechtstreeks op een objectglaasje. Plaats enkele druppels zoutoplossing die qua grootte vergelijkbaar moeten zijn met het monster. Meng de zoutoplossing met de ontlasting tot een homogeen mengsel is gevormd. Plaats een dekglaasje en onderzoek onder de microscoop.
Originele Faust-techniek
De tweede procedure bestaat uit de Faust float-methode, waarvan de oorspronkelijke versie bestaat uit:
1- Plaats voor dit doel ongeveer twee gram ontlasting in een geschikte bak.
2- Voeg 30 ml zinksulfaat flotatieoplossing toe waarmee een emulsie wordt gemaakt door de oplossing te mengen met de ontlasting.
3- Zeef met een metalen zeef in een tweede container en breng over naar een reageerbuis.
4- Voeg meer flotatieoplossing toe tot er een meniscus in de buis ontstaat.
5- Plaats een glazen dekglaasje op de meniscus. Laat het 10 tot 15 minuten rusten.
6- Verwijder het dekglaasje en plaats het op een objectglaasje, dat onder een microscoop zal worden onderzocht.
Faust-techniek door centrifugeren
Oorspronkelijk maakte de methode geen gebruik van centrifugeren, maar deze is nu opgenomen omdat er betere resultaten worden verkregen. De techniek omvat een reeks stappen om tot een juiste procedure te komen, deze zijn als volgt:
1- De ontlasting wordt gewassen met water, goed gemengd en vervolgens gefilterd met in vieren gevouwen gaas. Het monster wordt in een reageerbuis geplaatst.
2- Centrifugeer en verwijder het supernatant (monsters die boven water worden bewaard). Stappen 1 en 2 worden herhaald totdat het supernatant "helder" is.
3- Zinksulfaat wordt aan het gefiltreerde en gecentrifugeerde monster toegevoegd.
4- Het mengt goed.
5- Centrifugeer opnieuw gedurende 1 minuut bij 2500 tpm (omwentelingen per minuut).
6- De bovenstaande vloeistof wordt teruggewonnen met een steriele lus van ongeveer 5 mm; de buizen mogen niet worden geschud.
7- Het uit het supernatant gewonnen monster wordt op een objectglaasje geplaatst en een druppel Lugol kan op kleur worden geplaatst, het dekglaasje wordt geplaatst en onder een microscoop bekeken.
8- De containers en reageerbuizen zijn gelabeld.
Voordeel
- De elementen die voor de diagnose worden gebruikt, zijn schoon en zonder “detritus” te zien, dit vergemakkelijkt de observatie van het blad en vermindert de tijd die nodig is voor de diagnose.
- In het supernatant worden zowel larven, eieren en / of cysten gewonnen.
- Het is een zeer goedkope methode.
- De procedure is heel eenvoudig en gemakkelijk te implementeren.
- De diagnose is snel en nauwkeurig.
- Vanwege het belang en de hoge incidentie van parasitose in arme landen, zijn deze goedkope en gemakkelijk te gebruiken methoden ideaal voor de diagnose en monitoring van deze pathologieën.
Nadelen
De dichtheid van de flotatieoplossing veroorzaakt een samentrekking van de larven, dat wil zeggen dat ze krimpen en in een zeer korte periode kunnen vervormen. Dit dwingt de onderzoeker om de diagnose onmiddellijk te stellen en de behandelde monsters kunnen niet worden bewaard voor toekomstige onderzoeken.
Zoals bij alle microscopische identificatiemethoden, is een zeer ervaren onderzoekspersoneel vereist om nauwkeurige diagnoses te stellen.
De snelle vervorming van de elementen die nodig zijn voor de diagnose, hoewel ze een duidelijk nadeel zijn, kan worden gecorrigeerd door onmiddellijke microscopische waarnemingen te doen.
Referenties
- Ananias, FL (2017). Evaluatie van de gevoeligheid van de Faust-methode en spontane sedimentatie voor de diagnose van Giardia. Cuban Journal of Tropical Medicine, 68 (2).
- Bartlett, MS, Harper, K., Smith, N., Verbanac, P., & Smith, JW (1978). Vergelijkende evaluatie van een gemodificeerde zinksulfaatflotatietechniek. Journal of clinical microbiology, 7 (6), 524-528.
- Becker, AC, Kraemer, A., Epe, C., & Strube, C. (2016). Gevoeligheid en efficiëntie van geselecteerde coproscopische methoden - sedimentatie, gecombineerde zinksulfaatbezinking-flotatie en McMaster-methode. Parasitologieonderzoek, 115 (7), 2581-2587.
- Garcia, LS, Arrowood, M., Kokoskin, E., Paltridge, GP, Pillai, DR, Procop, GW,… & Visvesvara, G. (2018). Laboratoriumdiagnose van parasieten uit het maagdarmkanaal. Klinische microbiologische beoordelingen, 31 (1), e00025-17.
- Summers, WA (1942). Een wijziging van de centrifugale flotatiemethode met zinksulfaat voor het terugwinnen van wormeicellen in geformaliseerde uitwerpselen. Journal of Parasitology, 28 (4), 345-346.
