KRUISTESTS: WAAR ZIJN ZE VOOR, TECHNIEK, GRONDGEDACHTE, FASEN - GENEESMIDDEL

Bij de Crossmatch zijn een aantal laboratoriumonderzoeken uitgevoerd om te bepalen of bloedproducten van een donor (voornamelijk volbloed en bolvormig verpakt) compatibel zijn met het bloed van de ontvanger.

Het is een aanvullende test op ABO-compatibiliteit en Rh-factor. De reden voor crossmatching is dat soms twee individuen (donor-ontvanger) dezelfde ABO- en Rh-groep hebben, maar hun bloed is nog steeds niet compatibel.

Bron: unsplash.com

Een dergelijke incompatibiliteit is te wijten aan de aanwezigheid van antilichamen tegen een reeks rode bloedcelproteïnen die bekend staan als minor antigenen. Deze antigenen worden niet routinematig getest zoals ze zijn voor bloedgroep (ABO) en Rh-factor.

Dit komt omdat de minder belangrijke antigenen veel minder vaak voorkomen en in elk individu een variabele expressie hebben, daarom is het vrijwel onmogelijk om ze in categorieën te groeperen, zoals het gebeurt met de groep en Rh-factor.

In plaats daarvan worden rode bloedcellen van de donor gemengd met patiëntenserum (major match test) en patiënt rode bloedcellen met donor serum (minor match test) om de aanwezigheid van antigeen-antilichaamreacties te detecteren.

Als er antilichamen tegen kleine antigenen zijn, hetzij in het serum van de patiënt of in het donorserum, wordt gezegd dat de test positief is, dus in de meeste gevallen kan die bepaalde eenheid bloed niet worden getransfundeerd.

ABO-groep

Om volledig te begrijpen waar kruisreacties over gaan, moet u eerst de basisprincipes van bloedgroepen kennen.

In die zin is het belangrijkste om te weten dat bloed kan worden ingedeeld in vier groepen: A, B, AB en O.

Elk van deze groepen brengt op het oppervlak van de rode bloedcellen een bepaald eiwit (antigeen) tot expressie, dat wordt geïdentificeerd als een vreemd element door de antilichamen van een potentiële receptor van een andere groep.

Het meest opvallende aan antigeen-antilichaamreacties bij het matchen van bloed is dat er geen voorafgaande blootstelling aan het antigeen nodig is om antilichamen te laten bestaan. Dit staat bekend als natuurlijke antilichamen.

Natuurlijke antilichamen

Om antilichamen in het lichaam van een individu te laten bestaan, is het in het algemeen noodzakelijk dat de witte bloedcellen van het individu eerder zijn blootgesteld aan het antigeen.

Dit betekent dat er bij het eerste contact tussen het vreemde antigeen en het organisme geen antilichamen zijn, aangezien deze later, na het eerste contact, worden gegenereerd. Daarom is het voor het immuunsysteem onmogelijk om antistoffen te hebben tegen bijvoorbeeld een bepaald virus, als het er in het verleden niet aan is blootgesteld.

De enige uitzondering op het bovenstaande zijn anti-AB-antigenen. In deze gevallen heeft de persoon antistoffen tegen het antigeen die hun rode bloedcellen niet hebben, ook al zijn ze nooit in contact geweest met de rode bloedcellen van iemand anders. Dit staat bekend als natuurlijke antilichamen.

Antigenen en antilichamen gerelateerd aan bloedgroep

Bloedgroepen worden in het geval van het ABO-systeem bepaald door de aanwezigheid van specifieke antigenen (A of B) op het rode bloedcelmembraan en, daarentegen, antilichamen tegen het afwezige antigeen op het erytrocytenmembraan.

Een persoon met bloedgroep A brengt dus antigeen A tot expressie op het oppervlak van zijn rode bloedcellen, terwijl er anti-B-antilichamen in het serum zijn.

Integendeel, bij groep B-patiënten wordt het B-antigeen gevonden terwijl de antilichamen anti-A zijn.

Patiënten met AB-bloed hebben echter zowel antigenen A als B. Daarom zijn er geen antilichamen, aangezien dit de rode bloedcellen van die persoon zou vernietigen.

Het tegenovergestelde doet zich voor in groep O, waar het erytrocytenmembraan geen van de twee antigenen (noch A noch B) vertoont, terwijl er in het serum anti-A- en anti-B-antilichamen zijn.

ABO-groep incompatibiliteit

Uit het bovenstaande kan de compatibiliteit van ABO-bloedgroepen gemakkelijk worden afgeleid, aangezien het kennen van het antigeen van het erytrocytmembraan automatisch de antilichamen in het serum kent. Zodat:

- Blood A is compatibel met groep A en groep O.

- Bloedgroep B is compatibel met bloed B en O.

- Mensen met groep O kunnen alleen O-bloed krijgen (aangezien ze anti-A- en anti-B-antilichamen hebben), hoewel hun bloed zonder problemen door alle andere groepen wordt ontvangen omdat het geen antigenen heeft.

- Tenslotte. degenen die bloedgroep AB hebben, kunnen bloed krijgen van alle andere groepen (A, B, O en natuurlijk AB), aangezien ze geen antilichamen hebben tegen een van de antigenen. Alleen mensen in groep AB kunnen AB-bloed krijgen, aangezien alle andere groepen antilichamen hebben die deze rode bloedcellen zouden vernietigen.

Kleine antigenen

Net als bij ABO-groepen, kan een reeks eiwitten worden aangetroffen op het oppervlak van erytrocyten die op dezelfde manier als antigenen functioneren als ABO-groepantigenen.

Deze antigenen zijn echter niet bij alle individuen aanwezig. Hun combinatie is heterogeen en de penetrantie (niveau van eiwitexpressie) is variabel, daarom is een indeling in groepen zoals die voor ABO en Rh bestaat onmogelijk. Dit is waar het zijn naam ontleent aan "minder belangrijke antigenen", ook bekend als "lage incidentie antigenen".

Hoewel ze niet vaak voorkomen, kunnen er natuurlijke antilichamen zijn tegen minder belangrijke antigenen. Onder hen zijn de meest voorkomende Lewis, MNS'en, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb en Kidd. Allemaal verantwoordelijk voor zeer ernstige hemolytische en posttransfusiereacties.

Bovendien kan er sprake zijn van sensibilisatie tegen minder belangrijke antigenen door eerder contact, hetzij met genoemde antigene eiwitten als gevolg van eerdere transfusies, of als gevolg van kruisimmuniteit.

Cross-immuniteit

Er wordt gezegd dat er kruisimmuniteit is wanneer twee antigenen uit twee verschillende bronnen (bijvoorbeeld een rode bloedcel en een bacterie) erg op elkaar lijken, tot het punt dat de antilichamen tegen een van deze antigene eiwitten ook reageren met de andere omdat ze bijna identiek zijn. .

Om dit beter te begrijpen, nemen we het vorige hypothetische voorbeeld (antigenen van een rode bloedcel en een bacterie). In geen van beide gevallen zijn er natuurlijke antilichamen, maar als een persoon wordt blootgesteld aan de bacteriën, zullen ze er antilichamen tegen aanmaken.

Dergelijke antilichamen zullen later reageren tegen een rode bloedcel als de antigenen ervan sterk lijken op die van de bacteriën die de vorming van antilichamen hebben veroorzaakt.

Als dit gebeurt, kunnen de rode bloedcellen met dat specifieke antigene eiwit niet worden gegeven aan de persoon die de antilichamen heeft, omdat er dan afstoting zou zijn. Hierin ligt het belang van kruisreacties.

Waar is crossmatching voor?

Omdat het onmogelijk is om het bloed van verschillende individuen te groeperen op basis van de minder belangrijke antigenen, is de enige manier om te weten of er antistoffen tegen de kleine antigenen van de rode bloedcellen van een andere persoon in het bloed van een persoon aanwezig zijn, door middel van crossmatching. .

In die gevallen waarin antilichamen aanwezig zijn, wordt een hemolyse- of agglutinatiereactie geactiveerd, daarom wordt geconcludeerd dat de reactie positief was; dat wil zeggen, er zijn antilichamen tegen minder belangrijke antigenen (hoewel niet precies bekend is welke). Anders is de test negatief.

Basis

Crossmatches zijn gebaseerd op de antigeen-antilichaamreactie. Daarom is het bij hen mogelijk om te detecteren of er in het serum van een ontvanger antilichamen zijn tegen de antigenen van de rode bloedcellen van de donor (of omgekeerd), waardoor een antigeen-antilichaamreactie wordt opgewekt.

Als er geen antilichamen zijn, treedt geen reactie op en wordt de test negatief gerapporteerd. Als de reactie daarentegen positief is (er is hemolyse of agglutinatie tijdens de test), kan worden geconcludeerd dat de antilichamen aanwezig zijn.

In die zin is het belangrijk op te merken dat er zowel in het serum van de donor als in het serum van de ontvanger antistoffen tegen rode bloedcellen kunnen zijn. Daarom zijn er twee soorten kruisreacties.

Soorten kruisreacties

Antilichamen tegen donorerytrocyten kunnen in het serum van de patiënt voorkomen; maar het tegenovergestelde kan ook voorkomen, namelijk antistoffen in het serum van de donor tegen de rode bloedcellen van de patiënt.

Daarom zijn er twee soorten crossmatch:

- Grote crossmatch.

- Kleine crossmatch.

Beide typen worden routinematig uitgevoerd in de bloedbank voordat bloedproducten worden getransfundeerd, aangezien als een van de tests positief is, er een hoog risico bestaat op transfusiereacties die het leven van de patiënt in gevaar kunnen brengen.

Grote crossmatch

Deze test beoordeelt of het serum van de ontvanger antistoffen bevat tegen de rode bloedcellen van de donor.

Als dit gebeurt, kunnen geen bloedproducten worden toegediend, omdat een grote hoeveelheid antilichamen die in het plasma van de patiënt aanwezig zijn, de rode bloedcellen van de donor zeer snel zullen vernietigen, waardoor catastrofale reacties in het lichaam van de ontvanger ontstaan. Deze reacties zijn zo ernstig dat ze levensbedreigend kunnen zijn.

Kleine crossmatch

In dat geval wordt bepaald of er antistoffen tegen de rode bloedcellen van de ontvanger in het serum van de donor zitten.

Als dat het geval is, beginnen de antilichamen de erytrocyten van de ontvanger te vernietigen. Aangezien de hoeveelheid antilichamen echter beperkt is, is de reactie minder intens; hoewel het nog steeds gevaarlijk is.

Fasen

Zowel de grote als de kleine crossmatch zijn onderverdeeld in drie fasen:

- Zoutoplossing.

- Thermisch of incubatie.

- Coombs.

In de eerste fase worden de rode bloedcellen en het serum gemengd in een zoutoplossing. Vervolgens wordt albumine toegevoegd en wordt het monster 30 minuten bij 37 ° C geïncubeerd om tenslotte verder te gaan met de coombs-fase.

Techniek

De crossmatch-techniek is relatief eenvoudig, omdat hierbij rode bloedcellen van de donor worden toegevoegd aan het serum van de patiënt (major crossmatch) en ontvangende erytrocyten aan donorserum (minor crossmatch).

Om de antigeen-antilichaamreactie in relatief korte tijd te induceren, moet een reeks gestandaardiseerde stappen worden gevolgd. Deze stappen worden hieronder op een vereenvoudigde manier samengevat.

Het is belangrijk op te merken dat de volgende sectie de belangrijkste compatibiliteitstest beschrijft, hoewel de stappen hetzelfde zijn voor de kleine compatibiliteitstest, maar waarbij de oorsprong van rode bloedcellen en serum wordt vervangen.

Zoutfase

- Voeg aan een reageerbuisje 2 druppels serum van de ontvanger toe (van de donor als het de kleine crossmatch is).

- Neem een monster van rode bloedcellen van de donor (van de ontvanger als het de kleine crossmatch is).

- Was en centrifugeer de rode bloedcellen.

- Resuspendeer in een oplossing tussen 3% en 5%.

- Doe een druppel van deze oplossing in de buis met het serum van de ontvanger.

- Meng voorzichtig.

- Centrifugeer.

- Lees het resultaat af in de display-lamp.

Thermische fase

- Voeg 2 druppels 22% albumine toe aan de buis waar de zoutfase is voltooid.

- Incubeer 30 minuten bij 37 ° C.

- Centrifugeer gedurende 15 seconden.

- Lees het resultaat af in de display-lamp.

Coombs-fase

- Haal de cellen uit de buis en was ze met een zoutoplossing.

- Schakel het supernatant uit.

- Voeg twee druppels Coombs-reagens toe.