STUART-MEDIUM: FOUNDATION, VOORBEREIDING EN GEBRUIK - BIOLOGIE - 2026

Het medium Stuart is een halfvaste agar of bouillon zonder voedingsstoffen, die wordt gebruikt voor het transport van biologische monsters. Het doel is om de stammen die in het monster aanwezig zijn gedurende een bepaalde tijd levensvatbaar te houden, maar zonder de microbiële populatie te vergroten.

Het is gemaakt door Moffet, Young en Stuart in 1948 en later aangepast door Toshach en Patsula. Het is samengesteld uit natriumglycerofosfaat, natriumthioglycolaat, calciumchloride en agar-agar. Dit laatste is aanwezig in het halfvaste medium en afwezig in de vloeistof. Sommige laboratoria voegen er methyleenblauw aan toe.

Culturette met Stuart-transport. Bron: door: CDC / Dr. Gilda Jones, Courtesy: Public Health Image Library

Ze worden meestal gebruikt als het niet mogelijk is om het monster onmiddellijk te zaaien. In dit geval wordt het monster in het transportmedium geplaatst, terwijl het wordt overgebracht naar het laboratorium dat de cultuur zal verwerken.

Op deze manier wordt gegarandeerd dat de aanwezige micro-organismen in leven blijven totdat ze in de overeenkomstige kweekmedia worden geïnoculeerd.

Aanvankelijk was het gebruik bedoeld om urethrale of vaginale monsters te transporteren waarbij de aanwezigheid van Neisseria gonorrhoeae werd vermoed. Later realiseerden ze zich dat het nut ervan breder kon zijn.

Het Stuart-medium bleek zeer efficiënt te zijn voor het behoud van labiele en kieskeurige micro-organismen zoals Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis, onder anderen. Naast andere niet-vervelende micro-organismen zoals Enterobacteriën.

Het Stuart-medium voorkomt in principe de uitdroging van het monster, handhaaft het osmotische evenwicht en houdt de micro-organismen op een ideale pH. Aan de andere kant bevat dit medium strategisch geen voedingsstoffen, waardoor micro-organismen zich niet kunnen vermenigvuldigen.

Er zijn speciale monstertransportapparaten op de markt die dit of een ander transportmiddel bevatten, de zogenaamde culturette. Ze kunnen ook in het laboratorium worden bereid.

Basis

Het doel van de Stuart-transportmodus is om de monsters zo dicht mogelijk bij hun oorspronkelijke staat te houden totdat ze worden verwerkt.

Natriumglycerofosfaat en calciumchloride is een buffersysteem dat werkt door de pH en osmolariteit te behouden.

Ondertussen werkt natriumthioglycolaat als een reductiemiddel en in het geval dat het agar bevat, geeft het het een halfvaste consistentie om de oxygenatie van het medium te vertragen. Ten slotte is methyleenblauw een oxidatie-indicator, dat wil zeggen dat het de aanwezigheid van zuurstof detecteert.

Het halfvaste medium met redoxindicator is ideaal voor het transporteren van monsters waarbij de aanwezigheid van anaërobe bacteriën wordt vermoed.

Kenmerken van het vervoermiddel

Het Stuart-medium voldoet, net als alle transportmiddelen, aan bepaalde kenmerken, waaronder:

-Houdt levensvatbare microbiële stammen in stand zonder te vermenigvuldigen.

-Bevat geen voedingsstoffen; De verbindingen zijn bedoeld om het monster gehydrateerd te houden, onder adequate pH- en osmolariteitsomstandigheden.

- Remt het autolyzaat van bepaalde delicate micro-organismen, zoals Pneumococcus.

-Het gebruik is tijdelijk, het mag niet te lang worden verlengd.

Voorbereiding

Halfvast Stuart-medium met redoxindicator

Home voorbereiding

Ingredienten

Natriumglycerofosfaat 10 gr

Natriumthioglycolaat 1,0 gr

Calciumchloride 0,1 gr

Methyleenblauw 0,002 gr

Agar-agar 3 gr

Gedestilleerd water 1 L

Meng de componenten en verwarm tot ze volledig zijn opgelost. Giet in buizen of speciale wattenstaafjes. Ze worden in de autoclaaf gebracht en 15 minuten gesteriliseerd bij 121 ° C. Laat de buisjes verticaal afkoelen (in de vorm van een blok). Bij kamertemperatuur bewaren.

Voorbereiding met commercieel medium

Weeg 14,1 g van het medium af in 1 liter gedestilleerd water. Warm regelmatig schudden tot het volledig is opgelost, het kan worden gekookt. De rest van de procedure zoals al beschreven.

Het gedehydrateerde medium is crèmekleurig en moet blauw aan de oppervlakte zijn. Dit komt door de aanwezigheid van methyleenblauw.

De pH van het medium moet worden ingesteld op 7,4 ± 0,2

Liquid Modified Stuart Medium (zelfgemaakt)

Ingredienten

Natriumglycerofosfaat 10 gr

Natriumthioglycolaat 1 gr

Calciumchloride dihydraat 0,1 gr

Gedestilleerd water 1000 ml

Het heeft dezelfde ingrediënten als de halfvaste stof, maar het heeft geen agar of methyleenblauw. In dit geval worden de componenten gemengd zonder verwarming en wordt 0,5 ml verdeeld in buisjes van 16 x 125 mm met schroefdoppen.

Het wordt gedurende 10 minuten gesteriliseerd in een autoclaaf bij 121 ° C. Voor bemonstering moeten dacron-wattenstaafjes worden gebruikt als het monster voor PCR is of rayon als het voor kweek is.

De buisjes worden bij kamertemperatuur bewaard.

Toepassingen

Commercieel zijn er speciale transportmiddelen voor monsters die culturette worden genoemd; Dit apparaat is een langwerpige, dunne buis met een wattenstaafje aan de binnenkant en aan het uiteinde is er een segment dat het halfvaste of vloeibare Stuart-medium bevat.

Het apparaat wordt geopend en het monster wordt genomen met het wattenstaafje. Het wordt dan terug in de buis gebracht totdat de punt van het wattenstaafje in het halfvaste transportmedium wordt gestoken; Sommigen nemen een polyurethaanspons mee die is geïmpregneerd met het vloeibare Stuart-medium, waarmee het monster wordt geconserveerd als het nat wordt gehouden.

In het geval dat de aanwezigheid van delicate micro-organismen wordt vermoed, moeten wattenstaafjes met houtskool worden gebruikt om het monster te verzamelen.

De monsters die kunnen worden genomen met wattenstaafjes of wattenstaafjes en die in dit medium kunnen worden overgebracht, zijn faryngeale exsudaten, rectale swabs en verschillende afscheidingen, waaronder: vaginaal, urethraal, wond, oculair, oor en abces.

Tijdens het overbrengen van het monster in het transportmedium naar het laboratorium moet worden vermeden dat het medium wordt blootgesteld aan extreme omgevingsomstandigheden (te koud of te warm). Plotselinge veranderingen in atmosferische druk moeten ook worden vermeden.

De tijd waarin het medium in staat is om een ​​micro-organisme levensvatbaar te houden, zal afhangen van de betreffende stam. Voor micro-organismen van het geslacht Neisserias en Haemophilus kunnen ze bijvoorbeeld tot 24 uur levensvatbaar blijven, maar stammen zoals Salmonella of Shigella kunnen dagen en zelfs weken duren.

Als geschat wordt dat de verwerking van het monster meer dan 4 dagen kan duren, verdient het de voorkeur het monster bij -70 ° C in te vriezen.

Identificatie van het monster in vervoermiddel

Het voorbereide vervoermiddel of de commerciële culturette moeten een label hebben waarop de volgende informatie zal worden geplaatst:

Voor- en achternaam van de patiënt: vermijdt verwarring van monsters.

Identificatienummer: het is handig om een ​​bestelling op het werk te bewaren.

Bron van monsterafname: helpt de bacterioloog bij het kiezen van de juiste voedingsbodems .

Behandelend arts: Soms is het nodig voor eventuele consulten.

Datum en tijd van de monsterafname: het is noodzakelijk voor de acceptatie of afwijzing van het monster volgens de tijd die is verstreken tussen de monsterafname en de ontvangst in het laboratorium.

Andere informatie die erg handig zou zijn om bij te voegen, is:

De vermoedelijke diagnose: begeleidt de toevoeging van speciale voedingsbodems volgens de vermoedelijke diagnose.

Antibioticabehandeling: het is nuttig om te worden bijgevoegd in het antibiogram.

Al deze informatie is essentieel om een ​​goede monsterverwerking te garanderen.

QA

Om de prestatie van het Stuart-medium te evalueren, kunnen bekende stammen worden geïnoculeerd en bewaard bij 25 ° C, zoals: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.

In alle gevallen wordt verwacht dat het het micro-organisme in kwestie herstelt, gedurende 24 uur bewaard.

Anderzijds kunnen andere stammen worden gebruikt zoals: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 en Escherichia coli ATCC 11775.

In alle gevallen wordt overvloedig herstel tot 96 uur verwacht.

Beperkingen

Sommige studies verzekeren dat het glycerofosfaat dat aanwezig is in het Stuart-medium kan worden gemetaboliseerd door sommige coliformen, naast andere gramnegatieve bacteriën, en zich daarom in dit medium kan vermenigvuldigen.

Dit risico neemt toe naarmate de monsterverwerking langer wordt vertraagd. Evenzo heeft de blootstelling van het Stuart-medium aan hoge temperaturen tijdens transport hier invloed op.

Referenties

1. "Transportmedium (microbiologie)." Wikipedia, de gratis encyclopedie. 13 april 2018, 10:36 UTC. 1 april 2019 Beschikbaar op: es.wikipedia.org
2. Microkit Laboratories: Cultuurmedia. Stuart Transport. Beschikbaar op: Beschikbaar op: Medioscultivo.com
3. LabLisan. Stuarts vervoermiddel. Beschikbaar op: lablinsan.cl
4. Wetenschappelijke MDM. De voordelen van het microbiologische transportmedium van Stuart. Beschikbaar op: mdmcientifica.com
5. Metrix Laboratoria. Stuart. 2017 Beschikbaar op: metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Microbiologische diagnose. 12 ed. Redactioneel Panamericana SA Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiologische diagnose. 5e druk. Redactioneel Panamericana SA Argentina.