CARY BLAIR-MEDIUM: GRONDGEDACHTE, BEREIDING EN GEBRUIK - BIOLOGIE - 2026

De gemiddelde Cary Blair is een halfvaste agar, die wordt gebruikt voor het transport en de bewaring van biologische monsters die darmpathogenen, micro-organismen en anaëroob labiel bevatten. Zoals alle transportmiddelen is het de functie om het monster in optimale omstandigheden te houden totdat het wordt gekweekt. De aanwezige pathogene micro-organismen en de bijbehorende microbiota moeten levensvatbaar blijven, maar zonder hun populatie te vergroten.

Cary Blair Medium is het resultaat van de formuleringswijziging van Stuart Transport Medium. De modificatie vond plaats in 1964 en bestond uit het vervangen van het pH-regelsysteem (glycerofosfaat) door een gefosfateerde anorganische buffer.

A. Culturette met Cary Blair Medium B. Krukcollector met Cary Blair Medium. Bron: A. Video Meganhow, verkrijg een wondcultuur 2011 youtube.com B. Gebruiker: Mattes

De herformulering was nodig omdat de makers beseften dat glycerofosfaat na een bepaalde tijd door sommige saprofytische bacteriën kon worden gemetaboliseerd. Deze vermenigvuldigen overlappen de aanwezige ziekteverwekkers.

Andere veranderingen waren de eliminatie van methyleenblauw, evenals een aanpassing van de pH naar alkaliteit (pH 8,4). Al deze veranderingen hebben de efficiëntie van het vervoermiddel verbeterd.

Oorspronkelijk werd Cary Blair-medium gebruikt voor het in stand houden van darmpathogenen, zoals Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae en Campylobacter sp.

Echter, de werkzaamheid bij het behouden van de levensvatbaarheid van veeleisende en labiele pathogenen is later vastgesteld, zoals: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae en sommige anaëroben.

Basis

Cary Blair Medium bevat natriumchloride, natriumthioglycollaat, dinatriumfosfaat, calciumchloride en agar.

Natriumchloride handhaaft de osmotische balans van het medium, dinatriumfosfaat en calciumchloride houden de pH in evenwicht. Natriumthioglycolaat van zijn kant behoudt een laag oxidatie-reductiepotentieel, terwijl het kleine deel van de agar zorgt voor de halfvaste consistentie.

Het Cary Blair-medium bevat geen voedingsstoffen, aangezien de functie van een transportmedium is om het monster te bewaren zonder dat het veranderingen ondergaat in termen van vocht en microbiële belasting; dat wil zeggen, het vermijdt dehydratatie van het monster terwijl de levensvatbaarheid en de hoeveelheid van de aanwezige micro-organismen behouden blijven.

Ten slotte voorkomt de licht basische pH de dood van micro-organismen door zuurgraad, vooral Vibrios zijn erg gevoelig voor zuren.

Voorbereiding

Cary Blair-medium is in de handel verkrijgbaar als een speciaal kant-en-klaar apparaat. Het transportsysteem wordt afgedekt door een plastic Peel Pack-zak. Binnenin zit een wattenstaafje voor het verzamelen van het monster en de containerbuis voor het halfvaste medium van Cary Blair.

Ook op de markt zijn er commerciële huizen die het gedehydrateerde medium leveren voor de bereiding in het laboratorium.

Weeg hiervoor 13,2 g van het gedehydrateerde medium af en los het op in een liter gedestilleerd water. Verwarm en schud het preparaat tot het volledig is opgelost. Verdeel het medium in reageerbuizen met schroefdop (bakeliet).

Stoom de buizen gedurende 15 minuten. Laat afkoelen en bewaar tot gebruik op kamertemperatuur.

Niet-geïnoculeerd Cary Blair-medium kan maximaal 18 maanden bij kamertemperatuur optimaal worden bewaard.

De pH van het medium moet worden ingesteld op 8,4 ± 0,2. De kleur van het geprepareerde medium is beige, met een zekere opalescentie.

Gebruik

Type monsters

Cary Blair Medium wordt gebruikt wanneer ontlastingsmonsters, rectale uitstrijkjes en vaginale uitstrijkjes niet onmiddellijk kunnen worden verwerkt.

Als er geen transportmiddel beschikbaar is, kunnen monsters worden bewaard bij -70 ° C.

Bemonstering

Het wattenstaafje wordt geïmpregneerd met het monster en wordt in het Cary Blair-medium gebracht zonder de bodem te bereiken.

Identificatie van het monster

Het Cary Blair-medium moet een label hebben waarin de basisgegevens worden geplaatst, zoals: voor- en achternaam van de patiënt, identificatienummer van het monster, herkomst van de monsterafname, behandelend arts, datum en tijd van afname. steekproef, vermoedelijke diagnose, antibioticabehandeling.

Overdracht

Bij fecale monsters stevig afgedekt en bij kamertemperatuur vervoerd. Terwijl het voor vaginale monsters op zoek naar anaërobe micro-organismen wordt aanbevolen om de monsters bij 4 ° C te vervoeren.

In alle gevallen is de aanbevolen transfertijd 4-6 uur, met een maximum van 24 uur.

Als de aanwezigheid van Campylobacter jejuni wordt vermoed in ontlastingsmonsters en deze niet binnen 24 uur kunnen worden verwerkt, wordt opslag in Cary Blair-medium bij 4 ° C aanbevolen.

Onderzoek uitgevoerd op het vervoermiddel van Cary Blair

Verschillende onderzoeken hebben aangetoond dat Cary Blair-medium levensvatbaar kan blijven voor enteropathogene micro-organismen van het geslacht Shigella en Salmonella tot 49 dagen na het nemen van het monster.

Van zijn kant kan Vibrio cholerae, een andere belangrijke darmpathogeen, 22 dagen overleven, terwijl Yersinia pestis (veroorzaker van builenpest en longpest) na 75 dagen kan worden hersteld.

Ondanks de aangetoonde duurzaamheid in termen van het terugwinnen van deze micro-organismen, wordt aanbevolen om de genomen monsters zo snel mogelijk in Cary Blair-medium naar het laboratorium te vervoeren.

Evenzo, zodra het monster het laboratorium bereikt, moet het zonder vertraging worden gezaaid in de respectievelijke kweekmedia.

Aan de andere kant wordt het Cary Blair-medium, naast dat het nuttig is voor het transport van facultatieve micro-organismen, ook aanbevolen voor monsters die anaërobe pathogenen bevatten.

In die zin hebben DeMarco et al. In 2017 een studie uitgevoerd met de titel: Survival of vaginal micro-organismen in drie commercieel verkrijgbare transportsystemen.

Ze toonden aan dat Cary Blair Transport Medium het beste transportmedium is voor het behoud en herstel van vaginale anaërobe micro-organismen. Evenzo toonden ze aan dat de hoogste herstelsnelheid werd bereikt wanneer de overdrachtstemperatuur 4 ° C was.

Daarom wordt geconcludeerd dat de transporttemperatuur voor vaginale uitstrijkjes (anaërobe micro-organismen) 4 ° C dient te zijn. Terwijl voor fecale monsters die op zoek zijn naar facultatieve micro-organismen, de ideale temperatuur de kamertemperatuur is.

QA

Om de kwaliteitscontrole van het Cary Blair-transportmedium te evalueren, zijn bekende stammen zoals Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae en Campylobacter sp.

Het medium wordt met de gekozen stam geïnoculeerd en 24 uur op kamertemperatuur gehouden. Ze worden vervolgens gezaaid in de bijbehorende kweekmedia. In alle gevallen wordt een bevredigend herstel van het betreffende micro-organisme verwacht.

Referenties

1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, et al. Overleven van vaginale micro-organismen in drie commercieel verkrijgbare transportsystemen. Anaëroob. 2017; 45: 44-49.
2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Vergelijking van conserveringsmiddelen voor opslag van ontlastingsmonsters. J Clin Microbiol. negentienvijfennegentig; 33 (8): 2176-2178.
3. Dan M, Richardson J, Miliotis MD, Koornhof HJ. Vergelijking van conserveringsmiddelen en vriescondities voor opslag van specimens van feces. J. Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151-4.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiologische diagnose. 5e druk. Redactioneel Panamericana SA Argentina.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Microbiologische diagnose. 12 ed. Redactioneel Panamericana SA Argentina.
6. Conda Pronadisa Laboratoria. Half Cary Blair. Beschikbaar op: condalab.com
7. Metrix-laboratorium. Cary Blair. Beschikbaar op: metrixlab.mx