BACTERIOLOGISCHE LUS: KENMERKEN, SOORTEN, TOEPASSINGEN - BIOLOGIE - 2026

De bacteriologische lus is een werkinstrument dat door microbiologen wordt gebruikt voor het zaaien van microbiële culturen (bacteriën of schimmels). Het is misschien wel het instrument dat het meest wordt gebruikt door deze professionals.

Het gebruik ervan lijkt eenvoudig, maar vereist in werkelijkheid veel training. Voordat met zaaien wordt begonnen, moet de lus worden gesteriliseerd in de bunsenbrander, waarna het microbiële inoculum wordt afgenomen dat afkomstig kan zijn van een vloeibare cultuur of een vaste cultuur.

Soorten bacteriologische lussen. Bron: geen machineleesbare auteur opgegeven. ば や お aangenomen (op basis van auteursrechtclaims).

Zodra het inoculum is genomen, kan het worden afgezet in een vloeibaar medium of gezaaid in een vast medium. Na elke procedure wordt de lus opnieuw gesteriliseerd. Het handvat is ook geschikt voor het maken van microbiële uitstrijkjes op een glaasje.

De bacteriologische lus heeft vele namen, waaronder: platina-lus of -lus, inoculatielus of zaadlus, maar de echte naam is Kohle-lus.

Het materiaal waarmee het handvat is gemaakt, is over het algemeen een nikkel-chroom (nichroom) legering of platina. Een andere variëteit die op de markt verkrijgbaar is, zijn de plastic wegwerpbacteriologische lussen.

Aan de andere kant zijn er verschillende soorten bacteriologische lussen, die elk een functie vervullen binnen de taken van een microbioloog. De keuze van het handvat hangt af van wat er moet gebeuren.

Om bijvoorbeeld een striatum door uitputting uit te voeren om een ​​micro-organisme te isoleren, wordt de platina-lus gebruikt, die eindigt in een gesloten ring, ongeacht of deze is gekalibreerd of niet.

Terwijl, als het om een ​​urinemonster gaat, waar het belangrijk is om CFU's te kwantificeren, het noodzakelijk is om de gekalibreerde lus te gebruiken. Evenzo is voor het inoculeren van biochemische tests, die moeten worden gezaaid door prikken, de naaldlus essentieel. Het is belangrijk dat het handvat wordt gehanteerd door getraind personeel.

kenmerken

Bacteriologische lussen bestaan ​​uit twee uitersten. Het ene uiteinde komt overeen met het handvat of de basis, terwijl het andere het handvat zelf is.

Handvat basis of handvat

De basis dient om het handvat vast te pakken tijdens het hanteren. Het is meestal van metaal, maar heeft een warmte-isolator om te voorkomen dat de operator wordt verbrand wanneer de punt van het handvat op de aansteker wordt gesteriliseerd. Hij meet ongeveer 20 cm, hoewel hij langer kan zijn. Het heeft een schroefdraad om het handvat aan te passen.

Handvat

Het is het functionele einde, dat wil zeggen, het is het deel dat in contact komt met micro-organismen en met de kweekmedia. Het bestaat uit een fijne draad die in de basis wordt gestoken.

Het handvat kan gemaakt zijn van nichroom of platina, daarom wordt het ook wel een platina handvat genoemd. Het is ongeveer 6,5 cm lang en heeft een dikte van ongeveer 0,20 mm. Het handvat met het handvat kan 26,5 cm lang zijn. De afmetingen kunnen van fabrikant tot fabrikant verschillen.

Soorten

Er zijn verschillende soorten bacteriologische lussen en elk heeft een specifiek gebruik. De soorten handgrepen zijn als volgt: gekalibreerde ringvormige handgreep, niet-gekalibreerde ringvormige handgreep, rechte of naaldvormige handgreep, spatelvormige handgreep, "L" -vormige handgreep en handgreep met scherpe punt.

Aan de andere kant kunnen de handvatten permanent of wegwerpbaar zijn. Die voor permanent gebruik worden gesteriliseerd in de aansteker, zijn herbruikbaar en zeer duurzaam. Hoewel wegwerpartikelen uit de fabriek steriel zijn, worden ze maar één keer gebruikt en weggegooid.

Toepassingen

Ringhandvat, niet gekalibreerd

Het is het meest gebruikte handvat in het microbiologisch laboratorium. Het wordt gebruikt om een ​​inoculum te nemen uit een microbiële suspensie (vloeibaar medium) of een deel van de kolonie (vast medium), om te worden gezaaid in een ander kweekmedium, ofwel een biochemische test of een meer verrijkt of selectief medium, al naargelang het geval. Het is ook handig voor het maken van microbiële uitstrijkjes op een objectglaasje.

Met dit type lus kan het initiële inoculum worden gestreept. Het is ook zo ontworpen dat het soepel over de agar glijdt, zonder deze te beschadigen. Dit vereist natuurlijk getraind personeel om de zaaitechniek te hanteren en de juiste kracht en bewegingen toe te passen om een ​​goede strepen te maken.

Met deze handgreep kunnen verschillende zaaitechnieken worden uitgevoerd. Vaste media in petrischalen worden bijvoorbeeld meestal gezaaid door uitputting (er zijn verschillende technieken, zie video 1).

Deze techniek is bedoeld om geïsoleerde kolonies te verkrijgen om ze te bestuderen en te identificeren, vooral wanneer het monster polymicrobieel is, dat wil zeggen dat de cultuur niet zuiver is (het bevat meer dan één type micro-organisme).

In plaats daarvan worden de wiggen in een simpele zigzag geplant om bacteriële massa te verkrijgen, wat in dit geval niet nodig is om kolonies te isoleren.

Soms worden ze ook gebruikt om bepaalde monsters te nemen. Rojas et al. Gebruikten bijvoorbeeld de bacteriologische lus om geschraapte vaginale weefselmonsters van ratten te verzamelen.

Bacteriologische lus met ringpunt, niet gekalibreerd. Bron: Pixinio.com

Ringvormige handgreep, gekalibreerd

Dit handvat is, zoals de naam al aangeeft, gekalibreerd om een ​​specifieke hoeveelheid microbiële suspensie te nemen. Het wordt gebruikt wanneer het nodig is dat het inoculum voldoet aan wat in de techniek is gestandaardiseerd.

Het is bijvoorbeeld heel gebruikelijk voor het planten van urineculturen. In dit geval kan een gekalibreerde lus van 0,01 ml en een gekalibreerde 0,001 ml worden gebruikt.

Opgemerkt moet worden dat gekalibreerde handvatten een foutmarge hebben, die varieert naargelang de hoek waarmee het monster wordt genomen en de grootte van de opening van de container.

Als de 0,001 ml lus verticaal wordt ingebracht in een container met een kleine opening (≤ 7 mm), zal de ingenomen hoeveelheid 50% minder zijn dan gewenst.

Dit komt doordat hoe kleiner de diameter van de mond van de houder, hoe hoger de oppervlaktespanning en daarmee de adhesiekrachten tussen (glas - vloeistof) toenemen. Dit zorgt ervoor dat de vloeistoflading die door het handvat wordt opgenomen, minder is.

Terwijl, als het onder een hoek van 45 ° wordt ingenomen in een container met een brede opening (≥ 22 mm), 150% meer dan de vereiste hoeveelheid kan worden verzameld. In dit geval is de oppervlaktespanning lager en nemen de glas / kunststof cohesiekrachten af, terwijl de vloeistof-vloeistof cohesiekracht toeneemt.

Vanwege het bovenstaande hebben andere methoden voor het kwantificeren van kolonievormende eenheden soms de voorkeur voor urinekweken.

Rechte of naaldhandgreep

Het wordt ook wel een draadgreep genoemd. Het wordt gebruikt om bepaalde biochemische tests te inoculeren, vooral die waarvoor de punctietechniek moet worden gezaaid. Bijvoorbeeld halfvaste media die in de vorm van een blok worden geprepareerd, zoals: SIM, MIO en O / F medium.

Bovendien is het in het geval van MIO en SIM die de beweeglijkheid evalueren, essentieel dat de punctie wordt uitgevoerd met een naaldlus, aangezien de interpretatie van een positieve beweeglijkheid plaatsvindt wanneer de bacteriën naar de zijkanten van het oorspronkelijke inoculum groeien.

Een test die is geïnoculeerd met een luslus, kan de resultaten vervalsen (vals positief). Om deze reden moet er bij dit type zaaien op worden gelet dat de punctie uniek is en dat wanneer deze wordt verwijderd, deze naar buiten komt in dezelfde richting waarin deze is binnengekomen.

Een andere test die met de naald moet worden gezaaid, ook al is deze in een wigvorm voorbereid, is de Kligler. Bij deze test wordt het niet aanbevolen om zuurstof diep in de agar te laten doordringen, aangezien een zuurstofarm medium nodig is om bepaalde chemische reacties te laten plaatsvinden. Dit handvat wordt ook gebruikt om een ​​specifieke kolonie aan te raken voor subcultuur.

Spatelvormige handgreep

De meeste micro-organismen geven zachte, gemakkelijk uit te werpen kolonies. Er zijn echter enkele microbiële agentia waarvan de kolonies hard en droog zijn, bijvoorbeeld mycobacteriën in het algemeen en sommige schimmels. In deze gevallen is het handig om het spatelvormige handvat te gebruiken.

"L" -vormig handvat

Het meest voorkomende gebruik is om schimmelculturen te beluisteren, vooral schimmels.

Handvat met scherpe punt

Het is nuttig om zeer kleine kolonies aanwezig in polymicrobiële culturen te nemen om ze te kunnen subculturen.

Zaaitechnieken

Video 1

Sterilisatie van het platina handvat

Het handvat moet voor en na gebruik worden gesteriliseerd. Om de bacteriologische lus in de aansteker te steriliseren, gaat u als volgt te werk: het handvat moet in het bovenste deel van de vlam worden geplaatst, in een zo verticaal mogelijke positie, zodat het vanaf de punt naar boven steriliseert.

Wanneer het fijne filament felrood wordt, kan het als steriel worden beschouwd. Om het te gebruiken, wordt het gekoeld en wordt het gekozen monster genomen. (Zie video 2).

Sterilisatie van de bacteriologische lus

Video 2

Referenties

1. "Bacteriologische lus" Wikipedia, The Free Encyclopedia. 23 juli 2019, 13:31 UTC. 18 augustus 2019, 22:45. Wikipedia.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Gekalibreerde metalen handgrepen voor microbiologen: een alternatief van nationale fabricage. Soc, kom. Microbiol. 2010; 30 (1): 37-42. Beschikbaar op: ve.scielo.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Microbiologische diagnose. 12 ed. Redactioneel Panamericana SA Argentina.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiologische diagnose. 5e druk. Redactioneel Panamericana SA Argentina.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F, et al. Bepaling van het analgetische effect van hexaanextract uit Eupatorium arsenei-bloemen in een acuut pijnmodel bij ratten. Mex. wetenschap. boerderij. 2015; 46 (1): 64-69. Beschikbaar op: scielo.org