ANTISTREPTOLYSIN O: KWANTIFICERING, GRONDGEDACHTE, TECHNIEK, PATHOLOGIEËN - BIOLOGIE - 2025

De O ASO is een antilichaam dat wordt gegenereerd als reactie op een infectie veroorzaakt door Streptococcus pyogenes, ook bekend als Streptococcus beta-hemolytische A. Deze groep produceert twee exotoxinen met hemolytische activiteit, streptolysinen "S" en "O" genoemd .

Streptolysine S is verantwoordelijk voor de bèta-hemolyse die optreedt in bloedagar en, hoewel het giftig is voor bepaalde cellen van het immuunsysteem, is het niet antigeen. Terwijl streptolysine O, dat labiel is tegen zuurstof, verantwoordelijk is voor de hemolyse die optreedt onder de bloedagar en dit antigeen is.

Streptococcus pyogenes / Diagram van wat er gebeurt in de ASTO-test (agglutinatiereactie). (Antilichamen gebonden aan latexdeeltjes die het specifieke antigeen bevatten). Bron: Gebruiker: Graham Beards / Alejandro Porto

Daarom, wanneer de cellen van het immuunsysteem een ​​interactie aangaan met streptolysine O, wordt een specifieke immuunrespons geproduceerd, die de activering van B-lymfocyten genereert. Deze cellen produceren antilichamen gericht tegen streptolysine O. Daarom worden de antilichamen genoemd antistreptolysine O.

Streptococcus pyogenes produceert verschillende pathologieën, waaronder: tonsillitis, erysipelas, impetigo, puerperale koorts, roodvonk en bloedvergiftiging. Antistoffen tegen streptolysine O verschijnen 8 tot 30 dagen na het begin van de infectie.

De meeste van deze infecties komen zeer vaak voor bij de bevolking, dus het is normaal dat mensen antistreptolysine O-antilichamen in hun bloed hebben. Lage titers duiden op een eerdere infectie met deze bacterie, maar hoge of stijgende titers duiden op een recente of aanhoudende infectie.

Kwantificering van antistreptolysine O-antilichamen

In het laboratorium kan de anti-streptolysine "O" antilichaamtiter worden gemeten door middel van een serologische test. De antistreptolysine O (ASTO) -test is gebaseerd op een agglutinatiereactie met latex.

Het kan semi-kwantitatief worden gedaan, rapportage in kruisen of de titer kan ook worden gekwantificeerd. Het is normaal en niet significant om waarden te vinden tot 200 IE / ml of Todd-eenheden / ml. Boven deze waarde wordt het als positief en klinisch significant beschouwd.

Bij deze test hoeft de patiënt niet te vasten. Serum wordt als monster gebruikt, dat wil zeggen dat het bloed van de patiënt wordt afgenomen en in een buisje zonder anticoagulans wordt geplaatst, en vervolgens wordt gecentrifugeerd om het serum te verkrijgen.

Basis van de ASTO-techniek

De techniek maakt gebruik van latexdeeltjes als drager om het streptolysine O antigeen te fixeren De geabsorbeerde antigeendeeltjes reageren met het serum van de patiënt. Als de patiënt antistreptolysine O-antilichamen heeft, zullen deze zich binden aan het antigeen dat aan het latexdeeltje is gehecht.

Deze binding veroorzaakt een agglutinatie die macroscopisch zichtbaar is. De intensiteit van de reactie is recht evenredig met de concentratie van aanwezige antilichamen.

Technieken

- Semi-kwantitatieve techniek

De intensiteit van de reactie kan semi-gekwantificeerd worden in kruisen. Om dit te doen, wordt een serologische reactieplaat genomen en geplaatst:

50 µl serum en 50 µl ASTO-reagens. Meng goed met een houten tandenstoker en plaats in een automatische mixer gedurende 2 minuten. Observeer. Als er geen automatische rotator beschikbaar is, moet dit handmatig worden gedaan.

Interpretatie

Suspensie zonder klonten (uniform): negatief

1. + = zwakke reactie

2. ++ = lichte reactie

3. +++ = matige reactie

4. ++++ = sterke reactie

Sera die positief zijn met 3 en 4 kruisen kunnen worden gekwantificeerd.

- Kwantitatieve techniek

Voor de kwantificering van de titer worden seriële verdunningen 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16 gemaakt.

Om dit te doen, gaat u als volgt te werk: 4 reageerbuisjes of Kahn-buisjes worden genomen en 0,5 ml fysiologische zoutoplossing wordt op alle buizen geplaatst. Vervolgens wordt 0,5 ml patiëntenserum aan de eerste buis toegevoegd. Mengt goed. Die buis komt overeen met de 1: 2 verdunning.

Vervolgens wordt 0,5 ml overgebracht naar buis 2 en goed gemengd. Deze buis komt overeen met de 1: 4 verdunning enzovoort, totdat de gewenste verdunning is bereikt.

Neem 50 µl van elke verdunning en reageer met 50 µl ASTO-reagens op een agglutinatieplaat, zoals uitgelegd in de semi-kwantitatieve techniek.

Interpretatie

Er wordt rekening gehouden met de hoogste verdunning waarbij zichtbare agglutinatie wordt waargenomen. De berekeningen worden als volgt uitgevoerd:

ASTO = Inverse van de hoogste positieve verdunning x de gevoeligheid van de techniek (constante).

Voorbeeld: patiënt met een positieve reactie tot 1: 8

ASTO = 8 x 200 IU / ml = 1600 IU / ml of Todd Eenheden / ml.

Referentiewaarde

Normale volwassene: tot 200 IE / ml

Normale kinderen: tot 400 IE / ml

aanbevelingen

Het wordt aanbevolen om een ​​positieve en een negatieve controle bij de patiënten te monteren om ervoor te zorgen dat het reagens in optimale conditie verkeert. Als de positieve controle niet agglutineert of de negatieve controle agglutineert, kan het reagens niet worden gebruikt.

De reactie moet na 2 minuten worden geïnterpreteerd, daarna is het niet meer geldig als er agglutinatie is. Dit zijn valse positieven.

Hyperlipemische sera verstoren de reactie. Ze kunnen valse positieven geven.

Een geïsoleerde ASTO-waarde is niet erg nuttig. Het moet gepaard gaan met de symptomen.

Daarnaast is het raadzaam om bij verdenking van reumatische koorts of post-streptokokkenglomerulonefritis minimaal 2 ASTO-metingen uit te voeren om de verhoging van de antistreptolysine O-spiegels aan te tonen en zo de diagnose te bevestigen.

Pathologieën met hoge antistreptolysine O-titers

Anti-streptolysine-antilichamen zijn verhoogd na het lijden aan een Streptococcus pyogenes- of groep A ß-hemolytische Streptococcus-infectie.

Onder hen zijn: acute faryngitis, roodvonk, impetigo, erysipelas, puerperale koorts en bloedvergiftiging.

Sommige patiënten die hebben geleden aan recente of terugkerende streptokokkeninfecties kunnen auto-immuunziekten krijgen als gevolg of complicatie van post-streptokokkeninfectie, zoals acute glomerulonefritis en reumatische koorts.

Post-streptokokken auto-immuunziekten

Reumatische koorts

Het is een inflammatoire complicatie of restverschijnselen die kunnen optreden 1 tot 5 weken na een streptokokkeninfectie. Antistreptolysine O-titers stijgen significant 4 tot 5 weken na het begin van de ziekte.

Een hoge ASTO-titer begeleidt de diagnose, maar is niet gerelateerd aan de ernst van de ziekte, en de afname ervan impliceert geen verbetering.

Antistreptolysine O-antilichamen reageren kruislings op collageen en spiervezels en tasten bepaalde organen aan (onder andere hart, huid, gewrichten en zenuwstelsel).

Deze complicatie of restverschijnselen treden op bij cardiale betrokkenheid, koorts, malaise, niet-etterende migrerende polyartritis, chorea, enz.

Acute glomerulonefritis

Acute glomerulonefritis is een niet-etterend gevolg dat wordt veroorzaakt door de afzetting van antigeen-antilichaamcomplexen op het glomerulaire basaalmembraan.

De vorming en circulatie van antigeen-antilichaam-complexen (ag-ac) gegenereerd door streptokokkeninfecties kan leiden tot exudatieve veranderingen en ontsteking van de glomeruli, met proteïnurie en hematurie.

Deze ag-ac-complexen worden afgezet in de glomerulus en activeren de complementcascade, wat resulteert in glomerulaire endotheelschade. Om deze reden wordt het als een auto-immuunziekte beschouwd, omdat het immuunsysteem van het individu zijn eigen weefsels beschadigt.

Antistreptolysine O-antilichamen zijn erg hoog en de complementniveaus zijn laag.

Referenties

1. Wiener Laboratories. ASO latex. 2000 Beschikbaar op: wiener-lab.com.ar
2. Wikipedia-bijdragers. "Anti-streptolysine O." Wikipedia, de gratis encyclopedie. Wikipedia, The Free Encyclopedia, 23 januari 2019. Web. 19 juli 2019.
3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Antistreptolysin O titer bij gezondheid en ziekte: niveaus en betekenis. Pediatr Rep. 2012; 4 (1): e8. Beschikbaar in: ncbi.nlm.nih
4. Sen E, Ramanan A. Hoe antistreptolysine O-titer te gebruiken. Arch Dis Child Educ Pract Ed.2014; 99 (6): 231-8. Beschikbaar in: ncbi.nlm.nih
5. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiologische diagnose. (5e ed.). Argentinië, Redactie Panamericana SA
6. González M, González N. 2011. Handleiding medische microbiologie. 2e editie, Venezuela: Directoraat media en publicaties van de Universiteit van Carabobo.