BLOEDCULTUUR: WAAR IS HET VOOR, GRONDGEDACHTE, PROCEDURE, RESULTATEN - BIOLOGIE - 2026

De bloedkweek is een bacteriologische test die de aanwezigheid van micro-organismen in het bloed probeert op te sporen. Bloed is van nature een steriele vloeistof en moet daarom onder fysiologische omstandigheden worden bewaard, dus de aanwezigheid van bacteriën of schimmels in het bloed is altijd pathologisch.

Wanneer bacteriën of schimmels in het bloed worden aangetroffen, maar de vermenigvuldiging niet groter is dan de eliminatie van micro-organismen door het immuunsysteem, wordt dit bacteriëmie (voor bacteriën) of fungemia (voor schimmels) genoemd; Maar als de micro-organismen ongecontroleerd in aantal toenemen, wordt dit sepsis genoemd.

Bloedcultuurflessen (geel: aerobiose bij kinderen, groen: aerobiose bij volwassenen en rood: anaerobiose bij volwassenen). Bron: foto gemaakt door de auteur MSc Marielsa Gil.

Bacteriëmie, fungemie en bloedvergiftiging brengen het leven van de patiënt in gevaar en moeten daarom onmiddellijk worden behandeld. Daarom vragen artsen bij een vermoeden van infectie in het bloed om een ​​bloedkweekonderzoek.

Deze bacteriologische analyse maakt het mogelijk om te weten of er al dan niet een infectie in het bloed is en om welk micro-organisme het gaat. Bovendien wordt, als het positief is, een gevoeligheidstest uitgevoerd om te weten welk antibioticum of antischimmelmiddel bij de behandeling kan worden gebruikt.

Als de bloedkweek daarentegen na 24 uur incubatie negatief is, mag deze niet worden weggegooid voordat deze 240 uur negatief is. Dit zorgt ervoor dat er geen langzaam groeiende micro-organismen zijn.

Om een ​​bloedkweek betrouwbaar te laten zijn, moeten extreme aseptische maatregelen worden genomen bij het nemen van het monster, en om de betrouwbaarheid en gevoeligheid van de test te verhogen, moeten minimaal twee monsters worden genomen tijdens of nabij de piek van de koorts.

Waar is het voor?

Bloed is een steriele vloeistof en als er micro-organismen in worden aangetroffen, is het 100% pathologisch. Deze situatie vertegenwoordigt een zeer delicaat ziektebeeld dat het leven van de patiënt in gevaar brengt.

Bloedkweek is een belangrijke bacteriologische test die de aanwezigheid van micro-organismen in de bloedbaan detecteert.

De micro-organismen kunnen het bloed via verschillende routes bereiken, dit kunnen extravasculaire infecties zijn zoals: longontsteking, intra-abdominale infecties, pyelonefritis, ernstige infecties van de huid, weke delen of artritis, onder andere.

Of het kan ook intraveneus zijn, bijvoorbeeld besmetting van intraveneuze of arteriële katheters, endocarditis, intraveneuze drugsverslaving, toediening van besmette medicijnen of oplossingen, enz.

Het tijdig detecteren en behandelen van de veroorzaker van sepsis is essentieel om de overleving van de patiënt te garanderen.

In die zin moet de arts de realisatie van een bloedkweek aangeven wanneer hij tekenen en symptomen waarneemt die wijzen op bloedvergiftiging, zoals: koorts (hoger dan 38 ° C) zonder een duidelijke infectieuze focus of, integendeel, onderkoeling (<de 36 ° C).

Andere tekenen kunnen zijn: koude rillingen, verhoogd aantal witte bloedcellen (> 10.000 cellen / mm ³ ) of significante afname van polymorfonucleaire cellen (<1.000 PMN / mm ³ ). Evenals de achteruitgang van meerdere organen of plotseling verlies van vitaliteit, naast andere waarschuwingssignalen.

Bacteriëmie kan constant, van voorbijgaande aard of met tussenpozen zijn. Dit is belangrijk bij het nemen van een monster, omdat het nodig is om het te nemen wanneer de kans groter is dat het micro-organisme circuleert.

Daarom wordt aanbevolen om minimaal 2 monsters op verschillende plaatsen te nemen. Bovendien is het ideaal dat het monster wordt genomen in koortsachtige pieken of wanneer de patiënt rillingen, extreme onderkoeling, zweten of tachycardie vertoont.

Om bloedkweek echter een echt nuttig hulpmiddel te laten zijn, moet het monster met uiterste zorg worden genomen. Een slechte manipulatie of een slechte asepsis op het moment dat het monster wordt genomen, kan de test ongeldig maken en valse positieven opleveren.

Basis

Het onderzoek bestaat uit het aseptisch nemen van twee of drie bloedmonsters en deze in speciale flesjes plaatsen.

Speciale apparaten voor het kweken van bloedmonsters worden bloedkweekflessen genoemd. Deze zijn ingedeeld in:

Volgens de leeftijd van de patiënt

-Pediatrisch gebruik

-Voor volwassenen.

Volgens het type micro-organisme

-Kolven voor aërobe micro-organismen (aërobe bacteriën, facultatieve bacteriën en schimmels).

-Bloedkweekflesjes voor anaërobe micro-organismen (strikt anaërobe bacteriën).

Sommige bevatten een vloeibaar kweekmedium en andere bevatten tegelijkertijd een vast en vloeibaar kweekmedium. Ze bestaan ​​ook met actieve kooldeeltjes.

Werkwijze

Aanbevelingen voor bemonstering

- Het monster te nemen door hoogopgeleid en opgeleid personeel op het gebied van microbiologie.

- Asepsis of grondige reiniging van de monsterafnameplaats is ongetwijfeld de belangrijkste stap.

- Zoals bij alle bemonstering, moet het gezondheidspersoneel de bioveiligheidsmaatregelen tijdens het proces volledig naleven (gebruik van handschoenen, schort, bril, enz.).

- Zorg ervoor dat alle benodigde hulpmiddelen voor het nemen van monsters aanwezig zijn.

- Label de injectieflacons met de volledige naam van de patiënt, de datum, het nummer van het medisch dossier, het tijdstip van afname van het monster en het laboratoriumvolgnummer.

-Het ideaal is om het monster te nemen voordat de patiënt met antimicrobiële therapie begint. Het wordt alleen aangegeven in het geval dat het niet functioneren van de lopende behandeling wordt vermoed. In dit geval moet het monster worden genomen voordat het medicijn wordt vervangen, met behulp van bloedkweekflessen met antibioticumremmers (actieve kooldeeltjes).

- Er moeten minimaal 2 monsters worden genomen op verschillende anatomische plaatsen, zoals de rechterarm en de linkerarm. Bij verdenking op endocarditis worden 3 monsters aanbevolen. Elk monster bevat twee flessen (één voor aerobiose en één voor anaerobiose).

Sample aantal

De hoeveelheid monster varieert afhankelijk van de leeftijd van de patiënt, maar de verhouding 1: 5 tot 1:10 moet altijd worden aangehouden met betrekking tot de verdunning van het bloed / kweekmedium.

Bij pasgeborenen is de aanbevolen hoeveelheid monster 1 ml bloed per injectieflacon. Er wordt een pediatrische fles gebruikt.

In het geval van zuigelingen tussen een maand en een jaar kan dit worden verhoogd tot 1,5 ml bloed per fles. Er wordt een pediatrische fles gebruikt.

Bij kinderen ouder dan 2 jaar is de juiste monsterhoeveelheid 2,5 ml bloed per injectieflacon. Er wordt een pediatrische fles gebruikt.

Vanaf de adolescentie kan het worden verhoogd tot een bloedvolume tussen 5 - 10 ml per fles. Er wordt een fles voor volwassenen gebruikt.

Ten slotte is de benodigde hoeveelheid in het volwassen stadium 8-10 ml per fles. Er wordt een fles voor volwassenen gebruikt.

Bemonstering

- Het bloedmonster kan veneus of arterieel zijn. Er wordt echter alleen arterieel bloed afgenomen als veneuze bemonstering onmogelijk is.

- Het wordt niet aanbevolen om een ​​monster uit een centraal veneuze katheter te nemen, tenzij:

1. Het is onmogelijk om het monster perifeer (veneus of arterieel) af te nemen.
2. Patiënten die risico lopen op bloedingen.
3. Wanneer de arts bacteriëmie vermoedt door besmetting van de centraal veneuze katheter.
4. Wanneer de koorts opnieuw optreedt na een stopzetting met koorts van 4 tot 5 dagen, ongeacht of de patiënt al dan niet een antimicrobiële behandeling krijgt.

Asepsis vóór bemonstering

- Kies de anatomische locaties voor bemonstering. Over het algemeen worden de aderen van het beste kaliber gekozen (basilicum of kopader).

- Volgens de Centers for Disease Control (CDC) in Atlanta (VS) moet de operator zijn handen wassen met 2% chloorhexidine of 10% povidonjodium vóór de monsterneming, naast het dragen van handschoenen.

-Palpeer en zoek de te gebruiken ader.

-Reinig het prikgebied op een roterende manier, maak bewegingen vanuit het midden naar buiten met zeepachtige chloorhexidine of antiseptische zeep. Spoel af met een steriele zoutoplossing.

Breng vervolgens een antisepticum aan en laat het inwerken. Voorbeeld chloorhexidinegluconaat 0,5% gedurende 1 minuut of povidonjood 10% gedurende 2 minuten. Vraag voor het laatste eerst of de patiënt allergisch is voor jodium. Als u allergisch bent, kunt u alcohol 70% vervangen.

Monsterextractie

- Plaats de tourniquet om de bloedstroom te versnellen en de ader te laten ontspruiten.

- Raak de prikplaats niet meer met uw vinger aan. Als dit strikt noodzakelijk is, moet de vinger op dezelfde manier worden gewassen als het prikgebied.

-Plaats de injectienaald of de hoofdhuid in de ader en zuig de benodigde hoeveelheid bloed af.

-Plaats geen katoen of gaas op de naald wanneer u deze verwijdert als deze niet steriel is.

-Verwijder de verzegeling van de flessen heel voorzichtig en zonder de dop aan te raken. Sommige auteurs raden aan om de dop te desinfecteren voordat het monster wordt ingeënt.

- Verdeel de juiste hoeveelheid bloed in de injectieflacons. Als het monster met een injector wordt genomen, wordt de benodigde hoeveelheid eerst in de anaërobe kolf en vervolgens in de aerobe kolf gegoten. Als het nemen wordt gedaan met de hoofdhuid (vlinder), wordt het op de tegenovergestelde manier gegoten.

- Meng de bloedkweekfles voorzichtig door deze om te keren.

- Verwissel handschoenen en herhaal de voorgaande stappen voor de tweede monsterafname.

-Als het tweede monster van een andere locatie is genomen, kan dit onmiddellijk worden gedaan, maar als het van dezelfde locatie is, moet u 30 tot 90 minuten wachten tussen het ene monster en het andere.

- Het monster moet zo snel mogelijk naar het laboratorium worden gebracht, indien dit niet mogelijk is, moet het maximaal 18 uur bij kamertemperatuur worden bewaard.

Cultuur

Eenmaal in het laboratorium worden de kolven bij 37 ° C geïncubeerd onder de omstandigheden van elke fles, dat wil zeggen in respectievelijk aerobiose en anaerobiose.

Bij de handmatige methode moet het bellen worden gestart na 24 uur incubatie en vervolgens interdaags. De ringen worden als volgt uitgevoerd: eerst wordt de dop van de fles gedesinfecteerd en wordt de naald van een steriele injector ingebracht. Vloeistof wordt uit de kolf gehaald en gezaaid op bloedagar en chocolade-agar.

Als er groei is, wordt een Gram uitgevoerd, subculturen in specifieke media, biochemische tests en antibiogram.

Bij geautomatiseerde methoden geeft de Bact / Alert-apparatuur een alarm af wanneer het detecteert dat een injectieflacon positief is. Op dezelfde manier moet het op bloedagar en chocolade-agar worden getikt.

Een andere methode die terrein wint, is het analyseren van de kolf na 6 uur incubatie door middel van massaspectrometrie. Deze methode heeft de gevoeligheid en snelheid van diagnose helpen verhogen.

Resultaten

Zolang de bloedkweekfles negatief is, kunnen voorlopige tussentijdse rapporten aan de behandelende arts worden gegeven. Het rapport geeft aan dat het negatief is in de uren dat het heeft geïncubeerd. Als het bijvoorbeeld negatief wordt tot de vierde dag, wordt het als volgt gerapporteerd:

Voorlopig resultaat: negatieve kweek na 96 uur incubatie.

Let op: de studie duurt 240 uur.

Als de bloedkweek positief is, wordt de behandelende arts onmiddellijk op de hoogte gebracht en wordt er een rapport verzonden met in ieder geval het grammen van de kolonie. Voorbeeld:

Voorlopig resultaat: bij een positieve kweek na 48 uur incubatie worden gram-negatieve bacillen en negatieve oxidase waargenomen. Identificatie en gevoeligheidstests zijn in uitvoering.

Deze informatie helpt de behandelende arts om, in afwachting van het eindresultaat van het laboratorium, een empirische therapie te starten richting het mogelijke micro-organisme.

Na voltooiing van het bacteriologische onderzoek, dat wil zeggen dat het micro-organisme is geïdentificeerd en het antibiogram beschikbaar is, moet het eindrapport zo snel mogelijk worden verzonden.

Bijzondere voorzichtigheid is geboden als het doelmicro-organisme Neisseria gonorrhoeae of Neisseria meningitidis is, aangezien deze bacteriën worden geremd in aanwezigheid van hoge concentraties natriumpolyanethosulfonaat (SPS).

Daarom mag deze verbinding in bloedkweekflessen niet meer dan 0,025% bedragen.

Aan de andere kant, als het bloedkweekmonster eerst in Vacutainer-buisjes wordt genomen, hebben deze buisjes concentraties SPS die giftig zijn voor meningokokken en gonokokken, dus het bloed moet binnen 1 uur worden overgebracht naar het bouillonkweeksysteem.

Hoe weet u of een bloedkweek positief is of besmet

Een bloedkweek wordt als besmet beschouwd als er slechts in één bloedkweekflesje groei is van het totaal genomen. En het vermoeden van besmetting neemt toe als het geïsoleerde micro-organisme een normale huidmicrobiota is: bijvoorbeeld: coagulase-negatieve Staphylococcus, Propionibacterium spp, onder anderen.

Bij immuungecompromitteerde patiënten mag echter geen enkel micro-organisme worden verwaarloosd, maar in dit geval zou het micro-organisme in verschillende monsters moeten voorkomen.

Aan de andere kant, als de gevoeligheid voor antibiotica van hetzelfde micro-organisme geïsoleerd in twee verschillende monsters hetzelfde is, is de infectie reëel.

Een ander kenmerk is de bacteriële lading, aangezien besmette bloedkweken laat groeien, terwijl echte infecties bij onbehandelde patiënten over het algemeen positief zijn na 14 uur incubatie wanneer het micro-organisme niet hinderlijk is.

Aan de andere kant kan het bij patiënten die met antimicrobiële stoffen worden behandeld enige tijd nodig hebben om te groeien omdat de belasting erg laag is.

Het verschijnen van meer dan één micro-organisme kan duiden op besmetting, maar als hetzelfde resultaat wordt herhaald in verschillende opnamen vanaf verschillende locaties, is het echt.

Referenties

1. "Bloedcultuur." Wikipedia, de gratis encyclopedie. 3 juli 2019, 17:28 UTC. 14 juli 2019, 19:05 en.wikipedia.org
2. Hervé B. Nieuwe technologieën in microbiologische diagnose: automatisering en enkele toepassingen in microbiële identificatie en gevoeligheidsstudie. Rev. Med. Clin. Telt. 2015; 26 (6) 753-763. Beschikbaar op: reader.elsevier.com
3. Villarroel P. Hoofdstuk 20: Sepsis en risico op hart- en vaatziekten. Cardiovasculaire gezondheid. pp 187-194. Beschikbaar op: fbbva.es
4. Sánchez R, Rincón B, Cortés C, Fernández E, Peña S, Heras EM Bloedculturen: wat hebben ze je verteld en wat doe je? Ziek glob. 2012; 11 (26): 146-163. Beschikbaar op: scielo.isc
5. Pardinas-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. Kans op succes van het verkrijgen van een positieve bloedkweek. Med. Interna Mex. 2017; 33 (1): 28-40. Beschikbaar op: scielo.org