BACILLOSCOPIE: PROCEDURE, WAAR HET VOOR IS EN TYPEN - GENEESMIDDEL - 2024

Het uitstrijkje is een diagnostisch hulpmiddel voor actieve longtuberculose. Het is een laboratoriumtechniek waarmee zuurvaste bacillen zoals Mycobacterium tuberculosis kunnen worden opgespoord en gemeten. Het is wereldwijd de meest gebruikte methode voor het stellen van de diagnose van actieve longtuberculose in de gemeenschap en voor het evalueren van de voordelen van behandeling.

Longtuberculose is een infectieziekte die wordt veroorzaakt door Mycobacterium tuberculosis en die de longen infecteert, maar ook andere organen en systemen kan aantasten. Wereldwijd lijden meer dan 6 miljoen mensen aan longtuberculose (tbc).

M. tuberculosis-cellen in een sputumuitstrijkje (Bron: Microrao / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0) via Wikimedia Commons)

Mycobacterium tuberculosis en andere niet-tuberculeuze Mycobacterium-soorten hebben een lipidencoating op de celwand die rijk is aan mycolzuur, dat na kleuring met basische kleurstoffen bestand is tegen verkleuring van zure alcohol.

Daarom worden speciale kleuringsmethoden gebruikt, zoals de Ziehl-Neelsen-methode. Deze eenvoudige en goedkope methoden zorgen ervoor dat de muur de vlek vasthoudt wanneer het monster wordt gespoeld met een zure oplossing, en de Mycobacterium-muur wordt rood in tegenstelling tot andere bacteriën die blauw worden.

Voor het maken van een uitstrijkmicroscopie is een sputummonster nodig, bij voorkeur 's ochtends bij het opstaan. Weefselmonsters of lichaamsvloeistofmonsters kunnen ook worden gebruikt.

Werkwijze

De monsters die voor uitstrijkmicroscopie moeten worden verwerkt, zijn sputummonsters, weefselmonsters of monsters van lichaamsvloeistoffen. Weefselmonsters kunnen worden geëxtraheerd door bronchoscopie of door biopsieën van lymfeklieren of andere weefsels.

Omdat tuberculose elk orgaan of systeem kan aantasten, kunnen de monsters zeer gevarieerd zijn, waaronder: urinemonsters, hersenvocht, pleuravocht, ascitesvocht, bloed, pus uit open holtes, biopsieën , enzovoort.

Extrapulmonale laesiespecimens moeten ook worden verwerkt voor kweek. Sputummonsters worden in de ochtenduren bij het opstaan ​​verzameld.

Meerdere monsters kunnen achter elkaar of op opeenvolgende dagen worden verzameld. Monsters moeten worden geëtiketteerd in gesloten flessen met wijde opening. Ze moeten de gegevens van de patiënt, het type monster en de datum van de monsterafname hebben.

Technische procedure

- Zodra het monster is verkregen, kan het worden gecentrifugeerd om te concentreren of direct worden gebruikt. De eerste procedure bestaat uit het plaatsen van een paar druppels van het monster en deze op een objectglaasje verspreiden.

- Het monster is bedekt met gefilterde fuchsine (kleuroplossing).

- Vervolgens wordt het verwarmd tot ongeveer drie emissies van witachtige damp worden verkregen.

- Wacht vijf minuten totdat het monster is afgekoeld en was het met water.

- Het is bedekt met een bleekoplossing (zure alcohol) gedurende een periode van 2 minuten.

- Het wordt weer gewassen met water.

- Het monster wordt bedekt met methyleenblauw en laat het een minuut staan.

- Af te wassen met water.

- Laat het drogen in de lucht en ga verder met de observatie onder de microscoop.

Foto van een microscoop (afbeelding door Konstantin Kolosov op www.pixabay.com)

Deze procedure is snel, eenvoudig, goedkoop en zorgt ervoor dat Mycobacterium tuberculosis-cellen rood kleuren. Deze techniek wordt de Ziehl-Neelsen-kleurtechniek genoemd.

Microscopische observatie bestaat uit het identificeren van de aanwezigheid van zuurvaste bacillen en hun kwantificering per veld.

Mycobacterium tuberculosis-cellen verschijnen als rode, korrelige, gebogen staafjes op een blauwe achtergrond. Ze kunnen worden geïsoleerd, gekoppeld of gegroepeerd. De observatie moet per veld worden uitgevoerd en voor elk uitstrijkje moeten ten minste 100 velden worden onderzocht.

Het resultaat wordt als positief beschouwd als er in elk veld meer dan 10 M. tuberculosis-cellen zijn. Dit komt overeen met 5.000 tot 100.000 bacillen voor elke milliliter monster.

In deze gevallen wordt het als positief beschouwd voor Mycobacterium tuberculosis, aangezien niet-tuberculeuze Mycobacterium of andere zuurresistente bacteriën verschillende vormen hebben en in het algemeen de waargenomen hoeveelheid per veld minder dan 10 is.

De persoon die het monster onderzoekt, moet ervaring of expertise hebben in het opsporen en herkennen van deze micro-organismen, aangezien fout-negatieven of fout-positieven in de resultaten kunnen voorkomen.

Er zijn andere fluoroscopische technieken die gevoeliger zijn, maar veel duurder. Een van deze technieken maakt gebruik van Auramine-O-kleuring om groene fluorescentie te verkrijgen of Auramine O / Rhodamine B-kleuring om geel / oranje fluorescentie waar te nemen.

Positieve gevallen worden over het algemeen uitgevoerd voor kweek en antibiogram om de diagnose en de juiste selectie van behandeling te bevestigen.

Waar is uitstrijkjesmicroscopie voor?

Tuberculose is een infectieziekte die de longen en andere organen en orgaansystemen van het lichaam aantast. Het is een besmettelijke ziekte die ernstige verwondingen aan de luchtwegen veroorzaakt die, indien niet goed behandeld, de dood van de patiënt kunnen veroorzaken.

Tuberculose wordt bijna uitsluitend overgedragen via druppeltjes die in de lucht zijn opgehangen door het slijm van een patiënt die is geïnfecteerd met longtuberculose. Deze kleine druppeltjes kunnen in de lucht blijven en kunnen de persoon die ze inademt, infecteren.

M. tuberculosis-cellen (Bron: NIAID / CC BY (https://creativecommons.org/licenses/by/2.0) via Wikimedia Commons)

Infectie vereist een langdurige contacttijd met een geïnfecteerde patiënt die voortdurend bacillen spuugt in een slecht geventileerde omgeving. Mensen met immunodeficiënties lopen een grotere kans om besmet te raken.

HIV-positieve patiënten hebben meer kans op het ontwikkelen van ernstige luchtweginfecties, waaronder longtuberculose dan de rest van de bevolking. Vandaar het belang van uitstrijkjesmicroscopie als snelle en goedkope diagnostische methode voor tuberculose.

Met uitstrijkmicroscopie kan een bacteriologische diagnose van tuberculose worden gesteld, maar een positief resultaat moet met andere onderzoeken worden bevestigd.

Studies die de diagnose van tuberculose bevestigen, zijn onder meer radiologische onderzoeken met karakteristieke beelden in de bovenste lobben van de long, positieve tuberculinetests en positieve monsterculturen.

Negatief uitstrijkje

Een negatieve uitstrijkjesmicroscopie sluit de diagnose van tuberculose niet noodzakelijkerwijs uit, want vooral als het monster sputum is, is de eliminatie van bacillen niet constant. Daarom zijn in deze gevallen, wanneer de diagnose wordt vermoed, seriemonsters nodig.

Positief uitstrijkje

Een positieve microscopie van een uitstrijkje is indicatief voor tuberculose en moet worden bevestigd met andere aanvullende onderzoeken. Wanneer het resultaat positief is, moet een kweek en een antibiogram worden uitgevoerd.

Zodra de behandeling tot stand is gebracht, kan een aanhoudende afname van de positiviteitsschaal van de uitstrijkjesmicroscopie totdat negatieve resultaten worden verkregen, de voordelen van de behandeling beheersen.

Referenties

1. Aziz, MA (2002). Externe kwaliteitsbeoordeling voor AFB-uitstrijkmicroscopie.
2. Desikan, P. (2013). Sputumuitstrijkmicroscopie bij tuberculose: is het nog steeds relevant? The Indian Journal of Medical Research, 137 (3), 442.
3. Fauci, AS, Kasper, DL, Hauser, SL, Jameson, JL, en Loscalzo, J. (2012). Harrison's principes van interne geneeskunde (deel 2012). DL Longo (Ed.). New York: Mcgraw-hill.
4. Ngabonziza, JCS, Ssengooba, W., Mutua, F., Torrea, G., Dushime, A., Gasana, M.,… & Muvunyi, CM (2016). Diagnostische prestatie van uitstrijkjesmicroscopie en incrementele opbrengst van Xpert bij de detectie van longtuberculose in Rwanda. BMC-infectieziekten, 16 (1), 660.
5. Sardiñas, M., García, G., Rozenkransen, MM, Díaz, R., & Mederos, LM (2016). Belang van kwaliteitscontrole van bacilloscopie in laboratoria die de diagnose van tuberculose uitvoeren. Chilean Journal of Infectology: Official Organ of the Chilean Society of Infectology, 33 (3), 282-286.
6. Sequeira de Latini, MD, en Barrera, L. (2008). Handleiding voor de bacteriologische diagnose van tuberculose: normen en technische gids: deel 1 uitstrijkje microscopie. In Handboek voor de bacteriologische diagnose van tuberculose: normen en technische gids: deel 1 uitstrijkje microscopie (pp. 64-64).